人完全羧化骨钙素ELISA试剂盒(cOC)检测范围_分析方法_仪器仪表技术文献

提供者:15453839134  发布时间:2018/11/15  阅读次数:81次  

人完全羧化骨钙素elisa试剂盒(cOC)检测范围

1.检测范围0.25 ng/mL 8 ng/mL

2.灵敏度:最低检测浓度小于0.1ng/mL

3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.重复性:板内变异系数小于10%板间变异系数小于15%

操作步骤

1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃

2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL

3.样本孔待测样本50μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min

5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液350μL,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

6.每孔加入底物AB50μL37℃避光孵育15min

7.每孔加入终止液50μL15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

实验原理

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包人完全羧化骨钙素cOC)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人完全羧化骨钙素cOC)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。


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