讨论:最新实验室标准品的制备方法解析大全_技术交流_仪器仪表技术文献

提供者:15453842951  发布时间:2018/12/19  阅读次数:69次  

标准品是我公司热销并主营的产品系列之一,很多需要用其做检测实验的客户致电我公司。标准品的制备是非常复杂的问题,也是标 记免疫分析中比较难于制备的一个成分。下面是恒远免疫学第三方检测中心为大家带来的最新技术:实验室标准品的制备方法解析大全。

一、基质的制备
如前所述,作为标准品的介质(基质)成分应与被测样品相同。对大多数用于测定血清中某物质的标准品,应用不含被测物质的零血清制备,以求反应的介质环境相当。但有时零值血清的制备十分困难, 所以有些标准品用适当的缓冲液制备,并在缓冲液中加入一定量的载 体蛋白(一般用1%~2%的牛血清白蛋白),以便使其与样品的介质环境相近。

零值血清的制备方法有:
  1.吸附法:血清中小分子物质如三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)等,可用活性炭吸附去除。这种方法简便,但待测物质难以清 除干净,而且大分子活性物质不能用此法进行制备。
  2.反复冻融法:对大分子活性物质可选用低值血清,经反复冻融 使被测物质失活。用这种方法可使某些蛋白类激素大部分失活,但也难以得到真正的零值血清。
  3.亲和层析法:用特异性抗体制备亲和层析柱,用以吸附被测抗原。用这种方法可以得到高质量的零值血清,但本法比较复杂而且成本也高。


二、标准物纯品的选择
应选择高化学纯和高免疫纯的纯品作标准品。其中免疫纯尤为重要,在标准品中不应含有与被测物质有交叉反应的物质。

三、标准品的制备
先用零值血清配置高浓度的标准品,然后根据实验系统的要求, 用零值血清将高值血清稀释至应有的浓度,制成符合预定要求的,由不同浓度组成的系列标准品。

四、标准品的鉴定
  1.免疫活性的鉴定:选用高特异性的抗血清分别作公认标准品(如 WHO的国际参考品或国家标准品)的待鉴定标准品的剂量反应曲线,并 观察两条曲线的平行性。如两条剂量反应曲线平行,说明两种物质对 同一抗体有相同的亲和力,即二者是同质性物质。如两条剂量反应曲线不平行,说明两种物质具有异质性,因而这一待鉴定的标准品是不能使用的。
  2.浓度的标定:用已鉴定过的,免疫活性合格的标准品,与公认的标准品作浓度相同的剂量反应曲线。此时,两条剂量反应曲线应该 是基本重合的。如果两者平行但不重合,则取两条剂量反应曲线的50% 结合处的相应剂量(ED50)计算二者的换算系数,然后调整待鉴定标准 品的浓度,直至使两条剂量反应曲线完全或基本重合为止。

五、标准品的计量
许多小分子抗原或半抗原已能得到纯品或进行合成,它们对作为标准品的要求可以得到基本的满足,其计量多直接用单位体积中的重 量表示,如mg/ml、ng/ml、pg/ml等。最近WHO推荐用质量单位取代重 量单位,即mol/L、mmol/L、或nmol/L等。对大分子的活性物质则比较 复杂。由于得不到绝对的纯品,故很难直接用单位体积中的重量或单 位体积中的质量计量。因此,常用该物质的生物活性单位表示,如 IU/L、mIU/L等。

恒远免疫学第三方检测中心正品代理USP,Sigma等品牌标准品/对照品,安全可靠。购买后需要详细阅读说明书,使用时需要确保溶液的保存状态良好。 咨询采购,欢迎您联系我司业务员。

优质商品

动物步态分析系统
动物步态分析系统
网站首页 | 关于我们 | 联系方式 | 使用协议 | 版权隐私 | 网站地图  |  排名推广  |  广告服务  |  积分换礼  |  网站留言  |  RSS订阅  |  违规举报
 
免责声明:本站有部分内容来自互联网,如无意中侵犯了某个媒体 、公司 、企业或个人等的知识产权,请来电或致函告之,本网站将在规定时间内给予删除等相关处理。