近年来我国因为农药残留造成的食品安全事件时有发生,农药残留已经成为制约我国食品质量提高,影响我国对外贸易的一个重要因素。在食品安全检测中,农药残留量已经成为重要的检测指标,农药残留检测技术和标准是保证食品安全的重要支撑。形势的快速发展强烈要求我国的农药残留检测技术及时更新,只有认清方向,把握机遇,积极采用先进的检测技术,才能真正确保人类食品的安全消费。
随着生活水平的逐步提高,目前,人们对食品残留检测提出了更高要求,对食品残留检测的灵敏度的要求也越来越高,检测的范围也在扩大,不仅要求达到母体化合物的水平。还要达到异构体、对映体的水平。食品中的农药残留限量标准也(MRL)日趋严格。
在农药残留的风险评估上,越来越多的数据表明,农药残留不仅可能引起慢性毒性,同样也可引起急性中毒,特别是对儿童。
目前我国突出的农药中的杂质有三氯杀螨醇中的滴滴涕,2,4-滴和2,4,5-涕中的二恶英,有机磷中的氧化物,毒死蜱中的硫特普,还有代森类农药中的乙撑硫脲等。农药及其代谢物有乙酰甲胺磷与甲胺磷,马拉硫磷与马拉氧磷,涕灭威中的砜和亚砜代谢物,乐果与氧乐果,三唑酮中的羟基三唑酮等。
食品农药残留检测技术的发展趋势从农药残留检测技术来看,这几年有很大变化,主要表现在以下几个方面:检测范围由单个农药检测向多种农药检测发展,检测仪器从以GC检测为主转向以GC/MS特别是HPLC/MSn为主,检测方法特别是纯化方法有巨大变化,检测中试剂消耗上有明显减少。
因此,在未来的食品农药残留检测中,我们应该更多关注以下两个方面。
农药的多残留检测
从国际形势发展来看,多残留检测是一个趋势。多残留检测方法的特点是前处理简单、低成本、高灵敏度、高选择性、高效率、提供分子结构信息。目前世界各国的化学农药品种1400多个,普遍使用的有100多种杀虫剂、50多种除草剂、50多种杀菌剂、20多种杀线虫剂和30多种其他化合物。
从检测范围来看.目前有机磷农药还是占有很大的比例。叶类菜抽检中频率较高的有甲胺磷、敌敌畏、乐果、杀螟硫磷、甲基对硫磷和毒死蜱等,茶叶抽检中频率较高的有氰戊菊酯、联苯菊酯、吡虫磷、啶虫咪、甲氰菊酯、八氯二丙醚、三氯杀螨醇等,果品抽检中频率较高的有乐果、氧化乐果、三氯杀螨醇、杀螟硫磷、多菌灵、甲基托布净、克螨特等。
1、多残留检测方法
1963年有了Mills法,2003年有了QuEChERS法。这两个方法原理是一样的,但是后者简化了,在检测中的试剂消耗减少了,过去用大柱,现在用小柱,速度快了,溶剂量减少了。这是一个典型的方法转变的实例。目前国际普遍采用的农残检测方法有美国检测方法和德国的DFG-S19方法。
2、多残留检测仪器
目前,质谱仪的发展非常快。质谱的类型有MS、MS/MS、MSn、TOF、 Q-TOF、SECTOR、FT-ICR-MS等。离子化方式有EI、NCI、PCI、APCI、ESI、APPI(大气压光质解析电离源),可以与GC、LC等联接。用于农药多残留检测的主要有GC-MS、GC-MS/MS、GC-MSn、LC-MS/MS、GC(LC)-TOF。
样品前处理技术
农药残留检测前处理方法的改进我国现在已经引进GC/MS、HPLC/MSn等先进检测设备,仪器设备水平和国外相比差异不大,差距是在样品的收集、提取、纯化等前处理上。所以,怎样在现有仪器水平的基础上提高前处理的水平是提高检测水平的关键。
固相萃取(Solid Phase Extraction,SPE)技术是近些年迅速发展起来的一种样品前处理技术,在我国也普遍应用。SPE在很大程度上取代了传统的液-液萃取法,具有节省溶剂、加快纯化速度的特点。近年来SPE技术发展很快,在以下几方面取得了新的进展。
1、多相萃取技术(Mixed-Phase Extraction)
由于在农药残留分析的样品前处理中的基质和干扰化合物复杂。采用单一种类的SPE吸附剂有时难以有效去除,因此发展出了多相萃取技术。多相萃取是根据样品中目标组分的不同性质,采用两根或更多的柱串连,如用一根反相C18小柱和一根强阳离子交换柱串连,有机化合物留在第一根柱上,无机阳离子通过第一柱,但留在第二根柱上,从而使两类化合物获得了分离。
2、限制通行基质(RAM)
RAM用于分析药物和农药中的杂质和代谢物,最大的优点是可以直接进样。现在用得最普遍的是Dual-mode packings吸附剂。这个吸附剂外层是亲水的吸附剂层,内层是疏水的吸附层,有机化合物留在内层。RAM-SPE用于分析人血或其他蛋白质含量高的样品。RAM的吸附剂包括一个外层的diol层和一个C4疏水性内层。先在RAM柱上去除蛋白质和亲水性化合物,再通过一个转换装置通过一个C18柱来分离代谢物。
3、分子印迹聚合物 (Molecular imprinted polymers,MIP)
MIP是2001年以后发展起来的一项新技术。这是一种高稳定性的具有识别功能的聚合物。其原理是一个“锁和钥匙”的概念,也就是一个聚合物表面上的选择性受体或一个空位和用以制备MIP的模板分析物相匹配。从MIP上去除模板非常重要。最好的方法是选择的模板和要分析的目标物相似。目前生产MIP的公司主要有英国Affinity Chromatography Ltd、美国Aspira Biosystems Inc、德国Ellipsa AG和Instruction AG、瑞典MIP Technologies公司。MIP应用范围包括生物样品中的药物分析、环境中农药分析、食品中的农药分析以及利用手性MIP的合成来分离手性化合物的对映体。
4、免疫亲和SPE(IAE-SPE)
IAE-SPE的选择性更强,主要是根据生物学抗体-抗原反应的原理。IAE-SPE柱2006年已在美国生产,用于分析食品中的黄霉素、维生素B12。此外,专用于测定各种雌激素和环境中的有机磷农药、有机氯农药的IAE-SPE产品也已有生产。
5、基质固相分散提取技术(Matrix Solid-Phase Dispersion,MSPD)
MSPD现在用的比较多的是把固相样品如蔬菜磨成粉,和SPE填料一起磨,装柱后用溶剂淋洗下来。1989年最先由Bariker SA发展,用于固相、半固相、液相动物、植物样品的提取和纯化。优点是提取时间短,吸附剂、溶剂用量少,成本低,提取、纯化同时完成。因为把固体样品和SPE填料一起研磨,一起淋洗,这样一方面是转化的过程,一方面是提取的过程.MSPD本世纪以来用的很多。常用的吸附剂很多。C8、C18、GCB(石墨碳)、硅胶+硫酸、中性氧化铝、酸性氧化铝、Florisil、惰性的海沙都适用于MSPD。